东说念主肾皮质近曲小管上皮细胞系HK2女生 自慰,取自普通成东说念主肾脏的长生化近端小管上皮,通过转入HPV-16 E6/E7基因构建而成,并在无血清培养基中抓续滋长了一年多。HK-2的滋长依赖于表皮滋长因子EGF,保留了细致的PTCs的表型。
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阳性抒发:碱性磷酸酶;γ-谷氨酰转肽酶;亮氨酸氨肽酶;酸性磷酸酶;细胞角卵白; α3β1 整合素;纤连卵白。
阴性抒发:因子VIII 操办抗原、6.19 抗原和 CALLA 内肽酶呈阴性。
常见问题
在培养HK2细胞的时辰,常会出现一些细节问题,不成掉以轻心。本文为大家回来培养HK2细胞常见的问题,以及搞定决策。
出现空泡
01
空泡问题需要鸠集滋长速率和形式来看:若是滋长速率和形式普通,空泡可能是普通的细胞步履,传代后空泡即可裁减。
若是滋长较慢,形式颠倒,空泡可能是自噬看成,可加大血清比例(不跳跃20%)或更换血清品牌改善细胞景况。
出现拉丝
02
细胞伸出细长的丝有两种情况:
第一种情况是HK2细胞迁徙形成的,HK2细胞在培养皿上并不是静态的,也会出现迁徙。迁片晌HK2细胞的一部分淹留在原处,迁徙的经过中会拉出一条细长的丝。这种情况下拉丝的细胞占少数,细胞举座的滋长景况是普通的,毋庸特别处理。
第二种情况是养分不良,拉丝的细胞占大无数,同期细胞滋长平定,此时不错耕作血清比例(不跳跃20%)或添加5 ng/mL EGF。
形式分离
03
普通的HK2呈铺路石状滋长,若是HK2细胞呈镰刀状或不划定状(如下图),可能是因为培养环境发生了较大的改换,比如从有血清到无血清的退换,此时换回原本的培养条款细胞可迟缓归附;若是细胞变得细长,这时辰可能是养分不良。
滋长平定
04
在普诺赛尺度培养条款(MEM+10